1. <noscript id="hwnvm"><nav id="hwnvm"></nav></noscript>

          1. <u id="hwnvm"><wbr id="hwnvm"><bdo id="hwnvm"></bdo></wbr></u>

            銷售熱線

            15606837998
            • 技術文章ARTICLE

              您當前的位置:首頁 > 技術文章 > 做ELISA實驗,這些技巧少不了!

              做ELISA實驗,這些技巧少不了!

              發布時間: 2022-04-26  點擊次數: 200次

              做ELISA實驗,這些技巧少不了!


                  介紹:


                  ELISA試劑盒在國內有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯免疫試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒、酶聯免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒等。

                  Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。

               

                  特點:

                  1.高效、靈敏、特異的抗體。

                  2.穩定的重復性和可靠性。

                  3.吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體。

                  4.適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等多種標本類型。

                  5.節省實驗經費。

               

                  操作方法:

                  1.標準品的稀釋,請按照說明書進行操作。

                  2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。

                  3. 加樣:不規范的移液操作可能帶來誤差。

                (1)空白孔,空白對照孔不加樣品,生物素標記的抗NE抗體,鏈霉親和素-HRP,只加顯色劑A&B和終止液,其余各步操作相同;

                (2)標準品孔:加入標準品50ul,鏈霉親和素-HRP50ul(標準品中已事先整合好生物素抗體,故不加);

                (3)待測樣品孔:加入樣本40ul,然后各加入抗NE抗體10ul、鏈霉親和素-HRP50ul,蓋上封板膜,輕輕震蕩混勻,37℃溫育60分鐘。

                  4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

                  5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

                  6. 顯色:每孔先加入顯色劑A50ul,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。

                  7. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

                  8. 測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后10分鐘以內進行。

                  9. 根據標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據樣品的OD值在回歸方程上計算出對應的樣品濃度。也可以使用各種應用軟件來計算。

               

                  洗板方法:

                  一、手工洗板方法:

              甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內,浸泡1-2分鐘。根據需要,重復此過程數次。 

                  二、自動洗板:

                  如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

               

                  注意事項:

              1.從2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

              2.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。

              3.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。

              4.為避免交叉污染,要避免重復使用手中的吸頭和封板膜。

              5.不同批次試劑盒不能混用,如遇試劑不夠,請及時聯系客服解決

              6.底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。

              7.中、英文說明書或許會有不一致之處,請以英文說明書為準。  

              8.保存溫度:2-8℃。

              9.有效期:6個月(2-8℃)。


            在線咨詢
            咨詢熱線

            4001810298

            [關閉]
            一级毛片在线视频,2021免费黄色视频,国产揄拍视频在线观看,国产有又色又爽又黄的视频,久久国产精品免费观看一区