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              植物凝膠&瓊脂怎么選擇?

              發布時間: 2022-04-07  點擊次數: 503次

               

              植物凝膠&瓊脂怎么選擇?

              一、關于植物凝膠:

                植物凝膠由假單胞菌分泌而來,是葡萄糖醛酸、鼠李糖和葡萄糖等的混合物,其形成的凝膠具有無色、透亮和高韌性的特點;其克服了傳統瓊脂在植物組織培養中的固有缺陷,是配制植物組織培養基和微生物培養基的bu二選擇。

                植物凝膠的成膠需要二價陽離子的存在,且對pH敏感。一般植物培養基中的鈣離子和鎂離子的濃度足以讓植物凝膠凝固,鈣鎂離子減少應適當增加植物凝膠的用量;植物培養基一般調pH至5.8,pH低于5.5會嚴重影響植物凝膠凝固。微生物學研究所用的低鹽培養基,通常需要另外加入鈣鹽、鎂鹽或提高植物凝膠的加入濃度。植物凝膠常用工作濃度:MS培養基為例2.5-4 g/L;1/2MS培養基3-5 g/L。微生物培養基10 g/L。


              二、關于瓊脂:

                瓊脂,學名瓊膠,英文名(agar),又名洋菜(agar-agar)、海東菜、凍粉、瓊膠、石花膠、燕菜精、洋粉、寒天、大菜絲,是植物膠的一種,常用海產的麒麟菜、石花菜、江蘺等制成,為無色、無固定形狀的固體,亦常用作細菌培養基。為什么叫瓊脂,主要是用海南的麒麟菜或石花菜制作出來的。海南的簡稱就是瓊。

                瓊脂的最有用特性是它的凝點和熔點之間的溫度相差很大。它在水中需加熱至95℃時才開始熔化,熔化后的溶液溫度需降到40℃時才開始凝固,所以它是配制固體培養基的不錯的凝固劑。用瓊脂配制的固體培養基,可用以進行高溫培養而不熔化,在凝固之前接種時,也不致將培養物燙死。因此,瓊脂是制備各種生物培養基中應用最廣泛的一種凝固劑。植物組培培養基中常用濃度在0.7%左右(視瓊脂強度而定),而微生物培養基通常1.5%左右,對于偏酸性(pH小于6)的微生物培養基一般用到2%左右。


                三、植物凝膠與瓊脂的區別:

                1、植物凝膠和瓊脂都對酸性條件敏感,培養基pH不宜低于5.5,應適當添加使用量,pH值過低則完全不凝結。

                2、植物凝膠對鈣、鎂等二價陽離子有濃度要求,瓊脂則沒有,植物培養基鈣、鎂離子不足應適當增加植物凝膠使用量。

                3、植物凝膠保質期短,產品使用后應避光防潮保存。要求開封后一年內用完。瓊脂可長期儲存,對環境要求不高。

                4、植物凝膠用量小,但價格貴。

                5、植物凝膠成膠后透明度好,瓊脂凝膠透明度差


                四、植物組培培養基的配制方法:

                1、按要求溶解培養基基礎鹽和糖類,調pH至5.8;

                2、加入適量植物凝膠或瓊脂,121℃,滅菌15-20分鐘;

                3、冷卻至50-60℃,按實驗要求加入植物激素或抗生素,混勻;

                4、倒入培養瓶或者培養管,冷卻,凝固后接入外植體。

               

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